北京赛车pk10

产品目录
技术文章 北京赛车pk10 >> 技术文章 > 详细内容
研究发现:伯乐T100PCR仪的四点故障可能是这些原因导致的
点击次数:149 发布时间:2019-06-25
   研究发现:伯乐T100PCR仪的四点故障可能是这些原因导致的
  伯乐T100PCR仪现货特点:
  节省编程时间:直观的触屏操作,使编程更为便捷
  快速优化实验流程:温度梯度功能确保在一次实验中优化PCR条件,快速获得好的结果
  节省实验室空间:机身小巧紧凑,更坚固,便于安防
  先进的文件管理模式:个性化文件夹及USB闪存,易于保存和备份程序
  数据的高度一致性:性能稳定,升降温速快,重复性高,结果可靠
  故障一:假阳性
  出现的伯乐T100PCR仪PCR扩增条带与目的靶序列条带一致,有时其条带更整齐,亮度更高。
  引物设计不合适:选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性,因而在进行PCR扩增时,扩增出的PCR产物为非目的性的序列。靶序列太短或引物太短,容易出现假阳性。需重新设计引物。
  靶序列或扩增产物的交叉污染:这种污染有两种原因:一是整个基因组或大片段的交叉污染,导致假阳性。这种假阳性可用以下方法解决:操作时应小心轻柔,防止将靶序列吸入加样*内或溅出离心管外。除酶及不能耐高温的物质外,所有试剂或器材均应高压消毒。所用离心管及样进*头等均应一次性使用。必要时,在加标本前,反应管和试剂用紫外线照射,以破坏存在的核酸。二是空气中的小片段核酸污染,这些小片段比靶序列短,但有一定的同源性。可互相拼接,与引物互补后,可扩增出PCR产物,而导致假阳性的产生,可用巢式PCR方法来减轻或消除。
  故障二:出现非特异性扩增带
  伯乐T100PCR仪PCR扩增后出现的条带与预计的大小不一致,或大或小,或者同时出现特异性扩增带与非特异性扩增带。非特异性条带的出现,其原因:一是引物与靶序列不完全互补、或引物聚合形成二聚体。二是Mg2+离子浓度过高、退火温度过低,及PCR循环次数过多有关。其次是酶的质和量,往往一些来源的酶易出现非特异条带而另一来源的酶则不出现,酶量过多有时也会出现非特异性扩增。其对策有:必要时重新设计引物。减低酶量或调换另一来源的酶。降低引物量,适当增加模板量,减少循环次数。适当提高退火温度或采用二温度点法(93变性,65左右退火与延伸)。
  故障三:出现片状拖带或涂抹带
  PCR扩增有时出现涂抹带或片状带或地毯样带。其原因往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多引起。其对策有:减少酶量,或调换另一来源的酶。减少dNTP的浓度。适当降低Mg2+浓度。增加模板量,减少循环次数。
  故障四:母链结合
  当PCR反应加热至90-95左右时,会使模板DNA产生变形,解开为单链,当退火冷却至55-60左右时,因为引物分子量较小,运动速度较快,和母链碰撞的机会很多,所以退火时引物优先会与母链相互结合。引物如果太大,会导致退火时无法激发模板,即引物无法优先与模板链相互结合,而是与较多的互补模板链相互结合。所以引物不能太大,一般不可以超过30个脱氧核苷酸的长度。
  以上便是今天关于研究发现:伯乐T100PCR仪的四点故障可能是这些原因导致的全部分享了,希望对大家今后使用本设备能有帮助。
 

上一篇 详细说明伯乐CFX96Touch荧光定量PCR仪使用的操作步骤 下一篇 伯乐bio-rad全系列报单目录
上海土森视觉科技北京赛车pk10(www.weezat.com)热卖产品:ABIVeriti96PCR仪,伯乐T100PCR仪,ABI荧光定量pcr7500fast
版权所有 地址:上海市浦东新区惠南镇惠东路665号
电话:134-51872699 手机:13451872699 联系人:吴经理 邮箱:191639212@qq.com
ICP备: 技术支持: GoogleSitemap

推荐收藏该企业网站
北京赛车pk10 北京赛车 北京赛车 北京赛车 北京赛车 六合宝典 北京赛车pk10 六合宝典 六合宝典 六合宝典